HSP70腺相关病毒的制备、表达及纯化

作者：金欢胜; 吴雄飞; 金锡御; 倪兵

来源：重庆医学, 2009, (23): 2999-3001.

• HSP70
• 缺血预适应
• 腺相关病毒
• 肾脏 HSP70
• ischemia precondition
• eukaryotic rexpressing plamids
• kidney

目的构建HSP70腺相关病毒载体,用于肾脏缺血预适应(ischemia preconditioning,IP)中HSP70的作用及机制研究。方法利用已构建的转染真核表达重组质粒HSP70/pAAV-MCS,用磷酸钙转染法转染AAV-293细胞产生病毒颗粒,用氯仿-PEG8000/NaCl-氯仿的方法纯化病毒,用流式细胞仪检测病毒滴度。结果AAV-293细胞产生表达绿色荧光蛋白病毒颗粒,经纯化,其获得滴度为2.2×106的病毒液,其感染活性能满足下一步体内外转染实验所需。结论成功制备HSP70腺相关病毒并进行扩增及纯化,为下一步研究HSP70在肾脏缺血预适应中的作用及其机制打下基础。

• 单位
  新桥医院; 中国人民解放军陆军军医大学