重组人白细胞介素-1受体拮抗剂生物学活性检测方法的建立及验证

作者：俞露; 王莹; 张宇; 刘莹; 刘景会; 刘玉林^*

来源：中国生物制品学杂志, 2021, 34(11): 1370-1374.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.003478

• 重组人白细胞介素-1受体拮抗剂
• 人黑色素瘤细胞
• 生物学活性
• 细胞增殖

目的建立重组人白细胞介素-1受体拮抗剂(interleukin-1 receptor antagonist,IL-1Ra)生物学活性检测方法,并对方法进行验证。方法根据IL-1Ra阻断IL-1β杀伤人黑色素瘤细胞A375. S2的能力评价IL-1Ra的生物学活性,结果用标准品进行校正。对方法的样品起始浓度(8、10、12、14μg/mL)和IL-1β终浓度(2、4、6 ng/mL)进行优化,并验证方法的专属性、准确度、线性范围、中间精密度、耐用性。用建立的方法检测本公司在研产品3批原液和3批成品的生物学活性。结果确定该方法的样品起始浓度为8μg/mL,IL-1β终浓度为4 ng/mL。IL-1Ra原液缓冲液成分及成品中辅料成分对检测结果无影响;线性范围为6～13μg/mL,相关系数R2为0.992 1;准确度验证线性回归方程的斜率为0.975 8;不同试验人员于不同时间对1批原液、1批成品检测结果的几何变异系数(geometric coefficient of variation,GCV)分别为13.895%和8.670%,均<20%;不同细胞代次、不同细胞密度下相对效价测定值的GCV为5.595%,<20%。用建立的方法检测3批原液和3批成品的结果较稳定。结论成功建立了重组人IL-1Ra生物学活性检测方法,该方法准确度高,精密度好,耐用性强,检测结果稳定可靠,可用于产品的生物学活性评价和质量控制。

• 单位
  长春生物制品研究所