3-O-C₁₂-HSL通过抑制lncRNA CD48-AS和CD48的表达而阻碍Mo-DCs成熟

作者：罗燕芬; 庄奇真; 张轩; 陈茶; 刘杨; 颜星星; 肖倩; 李有强

来源：天津医药, 2021, 49(12): 1233-1239.

DOI：10.11958/20210909

• RNA
• 长链非编码
• 树突细胞
• 脂多糖类
• CD48抗原
• 计算生物学
• N-3-氧代十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯
• 长链非编码RNA CD48-AS

目的筛选并阐明长链非编码RNA（lncRNA）CD48-AS与其反义互补分子CD48 m RNA在N-3-氧代十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯(3-O-C12-HSL)阻碍人单核细胞诱导的树突状细胞（Mo-DCs）成熟过程中发挥作用的机制。方法从健康人外周血中分离Mo-DCs,将未成熟的Mo-DCs细胞分为阴性对照组（0.1%DMSO）、脂多糖（LPS）阳性对照组（100μg/L的LPS）和实验组(100μg/L LPS+40μmol/L 3-O-C12-HSL)进行lncRNA芯片检测。筛选lncRNA表达谱中差异表达5倍以上的自然反义lncRNA进行聚类分析,从中筛选差异具有统计学意义的自然反义lncRNA CD48-AS。未成熟的Mo-DCs分为阴性对照组、LPS阳性对照组以及LPS+C5、C10、C25实验组(分别加入5、10、25μmol/L的3-O-C12-HSL)。利用荧光定量PCR检测lncRNA CD48-AS和反义分子CD48 mRNA在实验体系中的表达水平;通过生物信息学分析lncRNA CD48-AS与CD48反义互补区及其蛋白编码功能;通过核糖核酸酶保护实验（RPA）验证lncRNA CD48-AS是否与CD48形成二聚体,从而通过影响靶CD48的表达来发挥调控作用。最后检测lncRNA CD48-AS在细胞内的定位。结果 3-O-C12-HSL处理Mo-DCs后lncRNA表达谱出现了特异性改变。3-O-C12-HSL可下调由LPS诱导的Mo-DCs中lncRNA CD48-AS及其反义靶分子CD48的表达。生物信息学分析lncRNA CD48-AS不具备蛋白编码功能,为非编码RNA;lncRNA CD48-AS与CD48形成RNA二聚体从而减少RNA酶对CD48 mRNA的降解,使得CD48 mRNA表达增加;lncRNA CD48-AS在Mo-DCs中主要定位在细胞核中,细胞质中表达量较少。结论 3-O-C12-HSL可通过下调lncRNA CD48-AS,进而影响CD48的表达来阻碍Mo-DCs的成熟。

• 单位
  南方医科大学; 广东省中医院