摘要
利用CDDP(Conserved DNA-derived Polymorphism)分子标记方法,对47个不同花色紫斑牡丹品种的基因组DNA进行遗传多样性分析。结果显示:(1)采用正交实验设计,对影响紫斑牡丹CDDP-PCR反应的引物浓度、DNA模板浓度两因素进行优化,优化后紫斑牡丹CDDP-PCR反应体系为:总反应体系20μL,其中包括2×Es Taq MasterMix酶(含染料)10μL,10pmol/μL引物1.5μL,15ng/μL DNA模板4μL,ddH2O 4.5μL。(2)21条引物中,有19条产生了清晰的条带。19条引物共扩增出112条带,其中多态性条带97条,占总条带数的86.61%,多态性比例高。(3)UPGMA聚类显示,47个紫斑牡丹品种的聚类大体按照花色聚类,品种间遗传相似系数值在0.720.95,说明品种间相似度高,差异程度小。研究表明,CDDP分子标记方法适用于紫斑牡丹遗传关系分析,且特异条带的产生为深入研究紫斑牡丹品种鉴别提供理论依据。
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