重组腺病毒介导MRP反义RNA逆转人肝癌细胞多药耐药表型的体外实验研究

作者：陈琳; 严律南; 苟兴华; 李德华; 韩蕾

来源：中华医学杂志, 2005, (38): 2719-2723.

• 抗药性,多药
• RNA,反义
• 肝肿瘤
• 重组腺病毒

目的探讨重组腺病毒介导的多药耐药相关蛋白(MRP)反义RNA对阿霉素诱导的人肝癌耐药细胞株SMMC-7721/ADM多药耐药表型的体外逆转作用。方法应用自行构建的携带反义MRP的重组腺病毒(Ad-Asm rp),在体外转染人肝癌耐药细胞,测定转染后细胞对阿霉素(ADM)及柔红霉素(DNR)的半数致死量(IC50)并计算耐药倍数(RF值);在转染后不同时间点用流式细胞仪动态测定细胞对DNR摄取的变化及细胞膜表面P190表达、并用RT-PCR反映细胞MRP之mRNA水平的变化。结果携带MRP反义RNA的重组腺病毒转染后的人肝癌耐药细胞对ADM、DNR的IC50分别为0.487μg/m l、0.328μg/m l,RF值分别为97.4、109.3,RF值分别下降36.8和35.4。在转染后24 h,MRP mRNA水平开始下降并呈持续下降趋势(P<0.01),48 h后伴有P190蛋白表达的持续下降(P<0.01),二者趋势一致。转染后48 h,经流式细胞仪测得细胞内DNR浓度明显上升(P<0.01)。结论重组腺病毒介导的MRP反义RNA可有效封闭MRP基因表达,在体外实验中能增加人肝癌耐药细胞株对化疗药物的敏感性,对肝癌耐药细胞的MDR表型有较好的逆转作用。

• 单位
  南京医科大学第一附属医院; 四川大学华西医院; 成都地奥制药集团有限公司