背俞指针疗法对胃食管反流病大鼠Beclin-1/Bcl-2介导ICC自噬-凋亡的影响

作者：罗贞艺; 谭金晶; 黎丽群; 刘园园; 李建锋; 刘礼剑; 谢洁如; 李娟; 谢胜^*

来源：时珍国医国药, 2022, 33(09): 2274-2277.

• 胃食管反流病
• 背俞指针疗法
• ICC
• 自噬
• 凋亡

目的 基于Beclin-1/Bcl-2蛋白相互作用探讨背俞指针疗法对胃食管反流病(gastroesophageal reflux disease, GERD)模型大鼠食管ICC“自噬-凋亡”的影响。方法 60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、西药组、指针组，除空白组外其他组采用食管支架置入术构建GERD模型。然后西药组予以枸橼酸莫沙必利分散片+兰索拉唑肠溶片灌胃；指针组采用背俞指针疗法干预，疗程为2周。另取5只SD大鼠食管，分离培养ICC细胞，经c-kiT免疫荧光鉴定后，取生长对数期的ICC采用L-谷氨酸及3-甲基腺嘌呤共孵，随后分为正常组、L-谷氨酸诱导ICC自噬组(诱导组)、3-甲基腺嘌呤抑制ICC自噬组(抑制组)。采用透射电镜观察食管ICC超微结构及自噬体；RT-qPCR法检测食管Beclin-1、Bcl-2的mRNA表达情况；免疫共沉淀检测大鼠食管组织及ICC细胞内Beclin1与Bcl-2蛋白相互作用。结果 与空白组比较，模型组ICC超微结构模糊，出现自噬小体，细胞核固缩坏死，线粒体肿胀、空泡化；与模型组比较，指针组ICC细胞超微结构改善，未见自噬小体。在食管组织中，与空白组比较，模型组Beclin-1/Bcl-2蛋白相互作用水平显著升高(P<0.01),Beclin-1 mRNA表达升高，Bcl-2 mRNA表达降低(P<0.01);与模型组比较，指针组、西药组Beclin-1/Bcl-2蛋白相互作用水平降低(P<0.05)。在ICC细胞内，与正常组比较，诱导组Beclin-1/Bcl-2相互作用水平显著升高(P<0.05);与诱导组比较，抑制组Beclin-1/Bcl-2相互作用水平降低(P<0.01)。结论 GERD模型大鼠食管ICC中存在自噬与凋亡现象，背俞指针疗法能有效改善GERD大鼠模型食管组织ICC超微结构，其机制可能与调控Beclin-1/Bcl-2相互作用介导的自噬-凋亡存在一定相关性。

• 单位
  广西中医药大学; 广西中医药大学第一附属医院