2-十三烷酮胁迫下棉铃虫FoxAl调控CYP6B6的表达

作者：魏倩; 刘小宁^*; 赵洁^*

来源：生物技术通报, 2022, 38(05): 84-92.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2021-1305

• 棉铃虫
• 叉头框类似蛋白
• 细胞色素P450酶
• 2-十三烷酮
• 转录因子

旨在研究2-十三烷酮胁迫对棉铃虫Helicoverpa armigera叉头框A类似蛋白(forkhead box A-like protein，FoxAl)基因表达水平的影响，及FoxAl蛋白是如何调控解毒酶基因CYP6B6表达，为进一步明确FoxAl参与棉铃虫解毒代谢和生长发育过程提供依据。通过酵母自激活检测FoxAl蛋白的转录激活能力；通过凝胶阻滞检测FoxAl蛋白与CYP6B6启动子的结合能力；通过RNAi沉默棉铃虫5龄幼虫中肠内FoxAl基因，检测不同时间(24，48，72和 96 h)后FoxAl和CYP6B6的表达变化情况；最后通过qPCR检测不同浓度(5，10和20 mg/g)2-十三烷酮处理不同时间(6，12，20，30和48 h)后棉铃虫6龄幼虫中肠内FoxAl和CYP6B6的表达谱，并分析FoxAl和CYP6B6表达谱的相关性。FoxAl蛋白具有激活酵母MEL1报告基因转录的能力，且该蛋白能与CYP6B6启动子中响应植物次生物质应答的核心片段结合。利用dsFoxAl沉默棉铃虫5龄幼虫中肠内FoxAl的表达量后，CYP6B6的表达量也显著降低。2-十三烷酮处理棉铃虫6龄幼虫后，中肠内FoxAl和CYP6B6的表达量变化情况相似，基本都呈抛物线趋势，在短时间12 h内两者的表达量迅速上升后，随胁迫时间的延长两者的表达量逐渐降低；此外，FoxAl和CYP6B6的表达量变化基本呈正相关，甚至在20 mg/g的胁迫浓度以及12 h和48 h的胁迫时间下两者都是高度正相关(r=0.819，P=0.045；r=0.987，P=0.007；r=0.978，P=0.011)。棉铃虫FoxAl蛋白可能是CYP6B6的转录激活因子，在植物次生物质2-十三烷酮短期胁迫下，FoxAl的表达量增加，进一步上调CYP6B6的表达，从而参与棉铃虫对2-十三烷酮的解毒作用。

• 单位
  石河子大学