Wnt5a对HaCaT细胞的增殖、周期及血管内皮生长因子的影响

作者：刘守刚; 罗光浦; 曲永彬; 黄莉宁; 底大可; 任盈盈; 王天晶

来源：皮肤性病诊疗学杂志, 2016, 23(05): 302-306.

• Wnt5a
• HaCaT细胞
• 2+浓度" name="keyword">Ca2+浓度
• VEGF

目的:以HaCaT细胞为细胞模型,探讨Wnt5a能否激活非经典Wnt5a/Ca2+信号传导途径,并检测其对HaCaT细胞增殖、周期和对血管内皮生长因子(VEGF)的影响,探讨Wnt5a在银屑病发病中的作用机制。方法:采用CCK-8检测不同浓度Wnt5a重组蛋白对HaCaT细胞增殖的影响;利用流式细胞仪技术测定Wnt5a对HaCaT细胞周期和Ca2+浓度的影响;不同浓度Wnt5a和Frizzled5分别刺激HaCaT细胞后,分别采用RT-PCR和Western blot技术检测HaCaT细胞内VEGF在mRNA和蛋白水平的表达变化。结果:5μg/mL、15μg/mL和25μg/mL的Wnt5a能够不同程度的提高HaCaT细胞的增殖能力,促进细胞周期从G1期向S期分化,其中15μg/mL和25μg/mL组与空白组相比具有明显差异(P<0.01)。同时,15μg/mL和25μg/mL的Wnt5a可增加HaCaT细胞内Ca2+浓度(P<0.05)。RTPCR和Western blot结果显示,Wnt5a和Frizzled5能不同程度的促进VEGF的表达,其中Wnt5a的效果更显著(P<0.05)。结论:外源性Wnt5a能促进HaCaT细胞增殖和周期,并增加细胞内Ca2+浓度,进而激活Wnt5a/Ca2+非经典信号传导途径,从而促进VEGF的表达。