乳酸片球菌L-乳酸脱氢酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

作者：黄彦; 韦宇拓; 张黎; 陈发忠; 黄日波

来源：应用与环境生物学报, 2006, (01): 68-71.

• L-乳酸
• L乳酸脱氢酶
• 乳酸片球菌
• 克隆
• 表达 L-lactate
• L-(+)lactate dehydrogenase
• Pediococcus acidilactici
• cloning
• expression

与其它微生物相比,用大肠杆菌进行发酵生产乳酸有许多优势,但大肠杆菌没有L乳酸脱氢酶基因,不能利用糖发酵生产L乳酸.本文采用PCR技术,以乳酸片球菌(Pediococcusacidilactici)基因组DNA为模板,克隆得到L乳酸脱氢酶(Llactatedehydrogenase)基因,将该基因的ORF连接到表达质粒pET22b(+),获得重组质粒pETldhL.将pETldhL质粒转化大肠杆菌BL21株,实现了ldhL基因的表达;对含有ldhL基因的重组菌株进行表达研究,在30℃以IPTG诱导8h后,SDSPAGE分析可见明显特异性条带,酶活力达到6.49u/mL,是野生菌酶活力(2.82u...

• 单位
  广西大学