鹰嘴豆α-淀粉酶抑制剂基因CL-AI的原核表达、纯化及生物学特性

作者：贾彦凤; 李林芝; 魏家萍; 王泽; 阿不都克玉木·米吉提; 顾爱星; 张桦; 麻浩

来源：核农学报, 2017, 31(05): 852-861.

• α-淀粉酶抑制剂
• 原核表达
• 蛋白纯化
• 发芽

为研究鹰嘴豆种子中新贮藏蛋白类型α-淀粉酶抑制剂CL-AI的抑制活性、生物活性以及三级结构,本研究利用前期克隆的α-淀粉酶抑制剂基因CL-AI及其2个亚基CL-AI-α、CL-AI-β分别构建原核表达载体p E-SUMO3,经诱导表达获得了CL-AI、CL-AI-α的可溶性融合蛋白和CL-AI-β包涵体融合蛋白,其中CL-AI-β通过构建含不同标签的表达载体,最终实现了可溶性表达。人唾液淀粉酶(HSA)抑制活性试验结果表明,CL-AI,CL-AI-α,CL-AI-β3个蛋白对HAS都有一定的抑制作用。发芽试验表明,CL-AI蛋白对小麦、玉米、水稻种子发芽过程中的发芽势、根长和芽长影响显著,与加入无菌水的处理相比,种子的简化活力指数显著下降。本研究结果为CL-AI蛋白的后续研究与应用奠定了基础。

• 单位
  南京农业大学; 新疆农业大学; 作物遗传与种质创新国家重点实验室