弓形虫RH株调节JAK1-STAT6信号通路诱导人原代肺泡巨噬细胞极化的研究

作者：刘学雷; 杨宁爱; 康宇婷; 杨红; 康佳; 周云花; 苏雅静; 赵志军^*

来源：中国病原生物学杂志, 2019, 14(09): 1005-1009.

DOI：10.13350/j.cjpb.190904

• JAK1-STAT6信号通路
• 巨噬细胞极化
• 弓形虫

目的探讨弓形虫感染人原代肺泡巨噬细胞的特点以及调节JAK1-STAT6信号通路对人肺泡巨噬细胞极化的影响。方法收集肺癌患者肺泡灌洗液,分离纯化肺泡巨噬细胞并作细胞爬片处理,体外选择1∶1的比例感染弓形虫并设置不同感染时间,Diff染色分析巨噬细胞内弓形虫的增殖情况。分别在不同感染时间收集细胞,提取全蛋白,Western blot检测信号通路蛋白的表达;Trizol法提取mRNA,反转录为cDNA后采用Real-time PCR检测相关mRNA的表达。结果成功分离并纯化得到肺泡巨噬细胞并感染弓形虫。Diff染色显示弓形虫可在肺泡巨噬细胞生存繁殖,从24 h开始弓形虫繁殖力较为明显增强,36 h时弓形虫数量显著增多并且从细胞内释放到细胞外。Western blot检测M1型巨噬细胞信号通路蛋白STAT1、P-STAT1和P-NF-κB呈先增高后降低的趋势,以P-NF-κB先升高后增加的趋势尤为明显;M2型巨噬细胞信号通路JAK1、STAT6和P-STAT6信号通路蛋白也呈现逐渐升高的趋势,iNOS的表达呈显著降低的趋势,Arg-1的表达量在6 h时较高(t=9.35,P<0.05)。Real-time PCR检测TNF mRNA相对表达量逐渐降低,iNOS mRNA相对表达量在6 h时升高,之后降低;Arg-1 mRNA相对表达量的相对表达量逐渐升高,48 h时表达量升高尤为显著(t=4.27,P<0.05)。结论弓形虫感染能诱导巨噬细胞表达M2型细胞炎性因子,并抑制M1型细胞因子的表达,可通过JAK1-STAT6信号通路调节人原代肺泡巨噬细胞向M2型巨噬细胞偏移。

• 单位
  宁夏临床病原微生物重点实验室; 宁夏医科大学