摘要
目的:探讨黄芪多糖联合Smac shRNA对高糖诱导的血管内皮细胞凋亡的影响。方法:以Smac shRNA慢病毒感染血管内皮细胞EVC-304,用Real-time PCR和Western blot法测定干扰效果。EVC-304细胞分为4组,对照组未处理,黄芪多糖组给予300 mg/L黄芪多糖,干扰组感染Smac shRNA慢病毒,黄芪多糖+干扰组用300 mg/L黄芪多糖培养感染Smac shRNA慢病毒的EVC-304细胞,随后4组均给予高糖处理。流式细胞术测定细胞凋亡,生化试剂盒测定培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量,Western blot法检测细胞激活型Caspase-3(C-Caspase-3)、C-Caspase-9蛋白的表达水平。结果:感染Smac shRNA慢病毒的EVC-304细胞Smac表达水平降低(P <0. 05)。Smac shRNA干扰或黄芪多糖处理均可降低高糖条件下EVC-304细胞凋亡率,提高SOD和CAT活性,减少MDA含量,抑制细胞中C-Caspase-3、C-Caspase-9蛋白表达,二者联用有协同作用(P <0. 05)。结论:黄芪多糖联合Smac干扰可抑制高糖诱导的血管内皮细胞凋亡,其作用机制可能与提高抗氧化酶活性、减少氧化损伤有关。
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单位胜利油田中心医院; 山东大学