NF-κB p50和p65蛋白保守结构域原核表达系统的建立

作者:李生茂; 梁华平; 徐祥; 刘东辟子; 沈利群; 蒋琴; 胡承香
来源:第三军医大学学报, 2004, (10): 878-881.
DOI:10.16016/j.1000-5404.2004.10.013

摘要

目的 为了获得具有DNA结合活性的人NF κBp5 0和p65蛋白 ,建立人NF κBp5 0和p65蛋白保守结构域的原核表达系统。方法 通过PCR法扩增获得人NF κBp5 0和p65蛋白保守结构域的cDNA ,后分别将其克隆到原核表达载体pET 2 2b( +)上 ,转化E .coliBL 2 1,经诱导表达及包涵体的变性和复性处理 ,获得可溶性p5 0和p65 ,同时用Western Blot鉴定NF κBp5 0和p65蛋白的表达 ,EMSA实验检测NF κBp5 0和p65蛋白的DNA结合活性。结果 构建了pET 2 2b/p5 0和pET 2 2b/p65原核表达质粒 ;p5 0、...

  • 单位
    创伤、烧伤与复合伤研究国家重点实验室; 第三军医大学大坪医院

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