多物种复合样品中转基因DNA成分的定量分析

作者：杨冬燕; 侯红利; 杨永存; 周向阳; 杨小柯; 郭良让; 李永红; 林健荣; 邓平建

来源：中国卫生检验杂志, 2009, 19(08): 1727-1730.

• 转基因
• 定量
• 复合样品
• 实时荧光PCR Genetically modified
• Quantification
• Composite material
• Real-time PCR

目的:在前期研究建立的不依赖参比内源基因定量单物种植物样品中转基因DNA的方法的基础上,定量测定多物种复合样品中转基因DNA的含量。方法:以转基因和非转基因大豆、玉米、大米按比例混合配制的多物种复合材料为研究对象,通过实时荧光PCR法测定样品DNA提取物中转基因DNA量,通过测定260 nm处的吸光值测定样品DNA提取物中总DNA量,以样品DNA提取物中各物种转基因DNA量与总DNA量之比表示多物种复合样品中各物种转基因DNA成分含量,并以各物种转基因DNA成分含量之和计算样品中转基因DNA的总含量。结果:7个大米与玉米两物种混合样品和7个大米、大豆与玉米三物种混合样品用于验证新建的定量体系的准确度和精密度。结果表明,两物种和三物种复合样品转基因成分总含量测定值与理论值的偏离度分别为2.22%~19.54%和5.24%~20.51%;其转基因成分总含量测定的变异系数分别为2.11%~13.43%和0.56%~10.74%。结论:新建的多物种复合样品中转基因DNA的含量测定方法满足转基因成分定量分析准确度和精密度要求。

• 单位
  华南农业大学; 深圳市农作物良种引进中心; 深圳市疾病预防控制中心