基因多态性分析在凝固酶阴性葡萄球菌菌种鉴定中的应用

作者：王亚娟; 沈叙庄; 高薇; 俞桑洁; 林影; 王慧欣; 何建平; 杨永弘

来源：中华检验医学杂志, 2005, 28(11): 1189-1192.

DOI：10.3760/j:issn:1009-9158.2005.11.025

• 凝固酶
• 葡萄球菌属
• 基因
• 多态性,限制性片段长度

目的建立快速凝固酶阴性葡萄球(CNS)菌种的基因鉴定方法。方法对培养获得的、经AutoScan4微生物分析仪和APIStaph鉴定系统鉴定为CNS的100株临床分离菌株和质控菌株应用tRNA基因间长度多态性PCR分析(tDNAPCR)和肠杆菌基因间相同序列(ERIC)两种分子生物学方法进行常见的CNS菌种鉴定,同时改良实验条件,并将tDNAPCR及ERICPCR两种分子生物学方法的鉴定结果与传统的AutoScan4微生物分析仪和APIStaph鉴定系统进行比较。结果tDNAPCR及ERICPCR两种分子生物学方法对质控菌株及经AutoScan4微生物分析仪和APIStaph系统鉴定的12种临床分离CNS菌株均可以得到各自不同的电泳图谱,它们可以快速、准确地对常见12种CNS,包括表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、人葡萄球菌、华纳葡萄球菌、模仿葡萄球菌、孔氏葡萄球菌、心耳葡萄球菌、松鼠葡萄球菌、头状葡萄球菌、施氏葡萄球菌、木糖葡萄球菌和里昂葡萄球菌进行菌种鉴定。从图谱的肉眼观察看,12种CNS均可以很好地鉴别开。tDNAPCR及ERICPCR与AutoScan4和APIStaph鉴定系统的一致率为95%。经Taq酶聚合后进行电泳,tDNAPCR在100～600bp产生6～10条DNA片段;ERICPCR在100～1200bp仅产生1～8条DNA片段。结论tDNAPCR及ERICPCR是快速、敏感的CNS菌种鉴定的方法,具有高度的特异性。

• 单位
  首都医科大学附属北京儿童医院; 首都医科大学