贝类中GII型诺如病毒的微滴式数字PCR定量检测方法

作者：姚丽锋; 王小玉^*; 蔡教英; 游淑珠; 丁琦; 符家忍

来源：农产品质量与安全, 2019, (04): 20-25.

• 贝类
• GⅡ型诺如病毒
• 微滴式数字PCR
• 定量分析

采用微滴数字PCR(ddPCR)技术,建立RT-ddPCR快速定量检测GⅡ型诺如病毒的方法。反应条件的退火温度为55℃,反应体系引物探针浓度分别为1、 0.25μM。建立的GII型诺如病毒RT-ddPCR方法的特异性和稳定性好;在单位体积内拷贝数20～60 000区间内呈现良好的线性关系, R2=0.997。本方法可以对单位体积拷贝数为20的样品进行稳定的定量检测,对单位体积拷贝数为6.6的样品进行稳定检测。精密度结果表明, 4组浓度的样品所得到的组内RSD值为2.86%～23.59%之间,均<25%;对23个贝类样品的检测结果与荧光PCR检测结果一致。本研究建立的GⅡ型诺如病毒的RT-ddPCR定量检测方法可用于贝类样品诺如病毒的快速定量检测。

• 单位
  拱北海关技术中心