双淬灭TaqMan探针应用于新型冠状病毒核酸检测的初步研究

作者：伍嘉豪; 张嫦丽; 王娴默; 范文^*; 易华伟^*

来源：病毒学报, 2022, 38(04): 784-790.

DOI：10.13242/j.cnki.bingduxuebao.004154

• 新型冠状病毒
• 核酸检测
• 荧光定量PCR
• 双淬灭TaqMan探针

核酸检测是新型冠状病毒肺炎（COVID-19）诊断的金标准。目前，临床上主要采用基于TaqMan探针的荧光定量PCR(qPCR)来检测新型冠状病毒（SARS-CoV-2）的N基因和ORF1a/b序列。在实际的核酸检测中，因采样和qPCR灵敏度问题导致的假阴性结果时有发生。为了优化SARS-CoV-2的核酸检测，我们设计了含有两个淬灭基团的双淬灭TaqMan探针，与单淬灭TaqMan探针相比，双淬灭TaqMan探针的背景荧光信号更低（161±9 vs.290±18）。同时，我们以N基因质粒和假病毒作为核酸检测的模板，发现双淬灭TaqMan探针检测体系具有更好的检测精密度（CV 1.4%vs 2.3%;0.6%vs 2.1%）以及更低的检测下限。

• 单位
  长江大学