摘要
目的:研究血小板反应蛋白2(thrombospondin 2,THBS2)在肺腺癌组织中的表达及其对肺腺癌细胞H1299和A549迁移能力、侵袭能力、上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的影响,并探究分子机制。方法:运用TIMER和GEPIA数据库分析THBS2 mRNA在泛肿瘤和肺腺癌组织中的表达,利用UALCAN数据库分析THBS2 mRNA在I-IV期肺腺癌组织中的表达差异,通过HPA数据库检测THBS2蛋白在肺腺癌组织中的表达情况。通过免疫印迹实验(Western blot)检测THBS2在人正常支气管上皮细胞(BEAS-2B)和肺腺癌细胞(H1299、A549)中的表达情况。应用质粒转染技术在肺腺癌细胞H1299和A549中分别过表达和敲低THBS2。细胞划痕实验和侵袭实验(Transwell)检测细胞迁移和侵袭能力。Western blot验证THBS2过表达和敲低效率,同时检测EMT相关蛋白和MMP2的表达水平。结果:TIMER数据库与GEPIA数据库检索结果显示THBS2 mRNA在肺腺癌组织中高表达(P<0.001)。UALCAN数据库分析证明,与正常肺组织相比,THBS2 mRNA在I-IV期肺腺癌组织中均显著表达(P<0.001)。HPA数据库结果显示,THBS2蛋白在肺腺癌组织中呈现中高等强度表达。细胞划痕实验、Transwell实验和Western blot结果表明,THBS2在人正常支气管上皮细胞和肺腺癌细胞中的表达有显著差异(P<0.01);过表达THBS2可增加肺腺癌细胞H1299和A549迁移与侵袭能力(P<0.01),EMT相关蛋白E-cadherin表达水平减少,而N-cadherin和Vimentin表达水平增加(P<0.01);相反的,敲低THBS2可抑制肺腺癌细胞H1299和A549迁移与侵袭能力(P<0.01),EMT相关蛋白E-cadherin表达水平增加,而N-cadherin和Vimentin表达水平减少(P<0.01)。结论:THBS2在肺腺癌组织中高表达;THBS2在肺腺癌细胞(H1299、A549)中的表达均显著高于人正常支气管上皮细胞(BEAS-2B);THBS2在肺腺癌细胞H1299和A549中的过表达和敲低影响迁移、侵袭和EMT的过程,可作为肺腺癌治疗的新型潜在靶点。
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单位徐州医科大学; 徐州市医学科学研究所; 徐州市中心医院