Aβ单链抗体基因腺相关病毒的包装和纯化

作者：蔡炯; 钟彦伟; 李方; 王世真

来源：基础医学与临床, 2009, (10): 1035-1038.

• 阿尔茨海默病
• 腺相关病毒
• A&beta
• 单链抗体 Alzheimer's disease
• adeno-associated virus
• A&beta
• single-chain antibody

目的包装和纯化携带Aβ单链抗体基因的腺相关病毒,为阿尔茨海默病的基因治疗创造条件。方法用Li-pofectamine2000将pSNAV2.0-Abeta-scFv质粒转染BHK-21细胞,并用G418筛选稳定细胞系。培养稳定细胞系,用辅助病毒HSV1-rc/ΔUL2感染包装携带Aβ单链抗体基因的腺相关病毒。用氯仿-PEG/NaCl-氯仿法和离子交换层析法纯化重组腺相关病毒,SDS-PAGE和PCR方法检测纯化的病毒。用地高辛标记探针测定重组腺相关病毒的物理滴度。利用水迷宫测试重组病毒对转基因阿尔茨海默病小鼠模型的治疗效果。结果带Aβ单链抗体基因的腺相关病毒的纯度为98%,物理滴度为1×101...

• 单位
  中国医学科学院北京协和医院; 中国医学科学院北京协和医学院; 解放军第302医院