维生素C联合内皮素-1促进胚胎干细胞向心肌细胞分化及机制

作者：林永青; 梁颖; 张海峰; 刘文浩; 杨莹; 王景峰

来源：中国老年学杂志, 2016, 36(17): 4148-4151.

• 维生素C
• 内皮素-1
• 胚胎干细胞
• 心肌细胞
• Shox2

目的探讨维生素(Vit)-C联合内皮素(ET)-1对胚胎干细胞(ESC)向心肌细胞分化的影响及其可能机制。方法体外培养ESC并给予Vit-C,摸索Vit-C作用于ESC的最佳浓度和干预时间;然后给予ET-1(100 nmol/L)或Vit-C(100μmol/L)+ET-1(100 nmol/L),观察两组对拟胚体搏动、Nkx 2.5、GATA-4及Shox2表达的影响。同时,以RNA干扰方法沉默Nkx 2.5、GATA-4及Shox2表达,观察沉默相应启动子表达水平后对Vit-C联合ET-1介导的拟胚体搏动增加的影响。结果 Vit-C最佳作用浓度为100μmol/L,最佳干预时间为分化的第49天,可使拟胚体搏动增加11.19%,同时上调拟胚体中心肌细胞标志物c Tn T以及心肌发育启动子Nkx 2.5、GATA-4及Shox2表达。在Vit-C基础上进一步给予ET-1,可进一步使拟胚体搏动增加11.07%,同时进一步上调c Tn T、Nkx 2.5、GATA-4及Shox2表达水平。沉默Shox2基因表达使拟胚体搏动幅度减少最明显,达12.94%。结论 Vit-C联合ET-1可获得进一步纯化的心肌细胞,上调Shox2是其促进ESC分化的最重要机制。

• 单位
  中山大学孙逸仙纪念医院