HIF1α/HIF2α经EGF调控胶质瘤细胞化疗抵抗机制研究

作者：杜军; 汪攀; 龚胜; 赵璐; 郭海燕; 廖彬^*

来源：重庆医学, 2022, 51(08): 1261-1265.

• 胶质瘤
• 低氧诱导因子1α
• 低氧诱导因子2α
• 表皮生长因子
• 缺氧
• 化疗抵抗

目的 通过体外实验探讨低氧诱导因子1α(HIF1α)和HIF2α经表皮生长因子(EGF)调控胶质瘤细胞化疗抵抗的机制。方法 采用CRISPR-CAS9系统单独或同时敲除U87细胞HIF1α和HIF2α表达(分为HIF1α单独敲除组、HIF2α单独敲除组、HIF1α/HIF2α同时敲出组),另设未转染的U87细胞为对照组。缺氧或常氧培养各组细胞并给予替莫唑胺(TMZ)处理，检测各组细胞毒性率和凋亡率。缺氧培养HIF1α/HIF2α同时敲出组的U87细胞，RT-qPCR检测EGF mRNA表达水平，进一步在培养基中添加EGF后予以TMZ处理，检测细胞毒性率和凋亡率。结果 Western blot提示U87细胞HIF1α和HIF2α敲除成功。缺氧条件下，HIF1α和HIF2α单独敲除组及HIF1α/HIF2α同时敲除组EGF表达水平较对照组显著降低(P<0.05),HIF1α/HIF2α同时敲除组EGF表达水平也低于HIF1α、HIF2α单独敲除组(P<0.05)。缺氧条件下，TMZ处理的HIF1α、HIF2α单独敲除组的细胞毒性率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),HIF1α/HIF2α同时敲除组细胞毒性率高于对照组及HIF1α、HIF2α单独敲除组(P<0.05);TMZ处理的HIF1α、HIF2α单独敲除组及HIF1α/HIF2α同时敲除组细胞凋亡率均高于对照组(P<0.05),HIF1α/HIF2α同时敲除组细胞凋亡率高于HIF1α、HIF2α单独敲除组。缺氧条件下，HIF1α/HIF2α同时敲除组添加EGF后，TMZ处理的细胞毒性率和细胞凋亡率均低于未添加EGF的HIF1α/HIF2α同时敲除组(P<0.05)。结论 HIF1α和HIF2α经EGF促进胶质瘤细胞化疗抵抗。

• 单位
  重庆市黔江中心医院; 重庆市人民医院