葫芦多糖及其硫酸化修饰物抗新城疫病毒活性

作者:阿得力江·吾斯曼; 萨比热·热夏提; 希尔艾力·阿不力克木; 况玲; 赛福丁·阿不拉*
来源:中国兽医学报, 2022, 42(08): 1640-1646.
DOI:10.16303/j.cnki.1005-4545.2022.08.18

摘要

为了探究硫酸化修饰对葫芦多糖(LSP)抗新城疫病毒(NDV)活性的影响,本试验利用Sephadex G-100方法纯化得到LSP,通过氯磺酸-吡啶法得到硫酸化修饰的sLSP1.3,用苯酚硫酸法对LSP及sLSP1.3进行多糖含量、蛋白含量及硫酸根取代度测定,经红外光谱测定LSP及sLSP1.3的官能团变化,结果显示,氯磺酸-吡啶法能够对LSP进行硫酸化修饰。利用MTT法测定LSP及sLSP1.3对鸡胚成纤维细胞(CEF)的安全质量浓度,结果LSP及sLSP1.3的安全质量浓度分别为50,10 mg/L,LSP经硫酸化修饰后对CEF的安全质量浓度下降。在安全质量浓度范围内以3种不同的加药方式(先添加LSP后接种病毒、先接种病毒后添加LSP、LSP和病毒混合后同时加入)检测LSP与sLSP1.3体外对NDV活性的影响,结果显示,LSP经硫酸化修饰后其抗NDV活性明显增强,其中sLSP1.3在5 mg/L时抗NDV感染能力和杀灭NDV的作用显著高于40 mg/L时(P<0.05)。检测LSP与sLSP1.3对新城疫模型鸡血清HI抗体效价及攻毒后的死亡率、保护率和痊愈率,结果显示,攻毒后各治疗组及病毒对照组抗体都逐渐升高,sLSP1.3组效价显著高于病毒对照组(P<0.05),但LSP和sLSP1.3之间无显著性差异(P>0.05)。攻毒后病毒对照组死亡率高达86.7%,而sLSP1.3组死亡率降低为66.7%(P<0.05);治疗组中sLSP1.3组的保护率显著高于LSP组,痊愈率达16.7%,保护率达33.3%。上述结果表明,LSP经硫酸化修饰后抗NDV活性显著增强且LSP使用的有效质量浓度显著降低。

全文