RNAi技术沉默星形胶质细胞Adam10基因模型的建立

作者：徐姣; 刘扬; 潘邓记; 杨园; 张函; 熊颖; 张强

来源：神经损伤与功能重建, 2016, 11(05): 377-380+384.

DOI：10.16780/j.cnki.sjssgncj.2016.05.001

• 星形胶质细胞
• Adam10基因
• RNA干扰

目的:建立离体星形胶质细胞Adam10基因沉默模型。方法:体外培养SD大鼠乳鼠星形胶质细胞,采用免疫荧光方法标记胶质纤维酸性蛋白(GFAP)以鉴定星形胶质细胞及其纯度。通过RNA干扰(RNAi)技术,使用转染试剂Lipofectamine2000将靶向作用于大鼠Adam10基因的si RNA序列转染至星形胶质细胞内,通过Real time-PCR和Western blotting技术在RNA水平和蛋白水平检测沉默效率。结果:靶向作用于星形胶质细胞Adam10基因的si RNA序列成功转染入星形胶质细胞,并且转染Adam10基因靶向干扰序列的星形胶质细胞Adam10基因的表达在RNA水平和蛋白水平较阴性对照组明显降低(P<0.05)。结论:可以通过RNAi技术建立离体星形胶质细胞Adam10基因沉默模型。

• 单位
  神经内科; 华中科技大学同济医学院附属同济医院