摘要

目的探讨多胺类似物二乙基去甲精胺(DENSPM)对去势抵抗性前列腺癌PC3细胞的体外作用,以及干扰精脒/精胺N1乙酰基转移酶(SSAT)基因表达对DENSPM作用的影响。方法构建SSAT小干扰RNA质粒(siRNA),并应用脂质体转染试剂Lipofectamine 2000转染PC3细胞,转染24h后加入预先配置好的DENSPM。DENSPM处理48h后收集细胞进行细胞计数试剂盒(CCK-8)增殖活性实验、流式细胞周期实验,抽提RNA和总蛋白分别进行实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹杂交,验证SSAT siRNA的干扰效果,检测DENSPM处理后SSAT mRNA和蛋白质的表达水平。采用高效液相色谱法(HPLC法)检测转染和药物处理后各组细胞内的多胺含量。结果空白对照组和DENSPM+siRNA组培养36、48、72h时的PC3细胞增殖活性均显著高于DENSPM组同时间点(P值均<0.05),空白对照组和DENSPM+siRNA组G0G1期细胞数均显著多于DENSPM组同期(P值均<0.05),G2M、S期细胞数均显著少于DENSPM组同期(P值均<0.05),空白对照组和DENSPM+siRNA组PC3细胞内精脒、腐胺、精胺水平均显著高于DENSPM组(P值均<0.05);空白对照组与DENSPM+siRNA组间培养各时间点的PC3细胞增殖活性,G0G1、G2M、S期的PC3细胞数,以及PC3细胞内精脒、腐胺、精胺水平的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。DENSPM组的SSAT mRNA和蛋白表达量分别为15.10±0.12和1.56±0.06,显著高于空白对照组的1.00±0.00和0.60±0.01,以及DENSPM±siRNA组的1.07±0.03和0.62±0.02(P值均<0.01)。结论多胺类似物DENSPM可抑制去势抵抗性前列腺癌PC3细胞增殖,诱导S期阻滞,诱导SSAT表达上调,促进多胺降解代谢。干扰SSAT表达可拮抗DENSPM的抗癌作用。

  • 单位
    同济大学附属东方医院; 周浦医院