丙型肝炎病毒NS5A蛋白对Huh7细胞周期的影响

作者：杨小骏; 叶林柏; 郜金荣; 刘静; **; 廖庆姣; 佘应龙; 吴正辉; 叶力

来源：病毒学报, 2005, (05): 349-352.

DOI：10.13242/j.cnki.bingduxuebao.001564

• 丙型肝炎病毒
• NS5A蛋白
• 细胞周期 hepatitis C virus
• NS5A protein
• cell cycle

应用PCR技术从含有丙型肝炎病毒(HCV)全长开放阅读框的质粒pBRTM/HCV 1~3 011中获得NS5A全长基因片段,利用基因重组技术将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(-)中。通过酶切、PCR及测序鉴定证实,NS5A基因已正确插入到pcDNA3.1(-)中。再利用脂质体介导转染Huh7细胞,30h后收获细胞,经Western blot验证,证实HCV的NS5A基因在Huh7细胞中已经获得表达。在培养条件完全一致的条件下,表达NS5A基因的Huh7细胞与pcDNA3.1(-)转染的细胞在转染30h后被收集起来,乙醇固定,PI染色后利用流式细胞仪检测细胞周期变化。G0/G1期由60.6...

• 单位
  武汉大学; 武汉科技大学; 病毒学国家重点实验室; 生命科学学院