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摘要
鸡球虫病是由几种艾美耳属寄生虫寄生引起的一种家禽肠道疾病。目前，对于该病控制仍然主要依赖于抗球虫药物，但长期广泛地使用药物造成了球虫耐药性的产生。为研究球虫耐药性产生的分子机制，本实验室前期对柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药株、地克珠利耐药株、马杜拉霉素耐药株以及敏感株进行了转录组测序并获得了敏感株与耐药株的差异表达基因，发现柔嫩艾美耳球虫保守蛋白35（EtCHP35）在盐霉素耐药株和马杜拉霉素耐药株mRNA转录水平显著上调。本研究以柔嫩艾美耳球虫敏感株孢子化卵囊cDNA第一链为模板，成功克隆了柔嫩艾美耳球虫保守蛋白35（EtCHP35）基因，并在原核表达系统中成功表达了重组蛋白（rEtCHP3）。利用实时荧光定量PCR分析了该基因在柔嫩艾美耳球虫不同发育阶段以及不同虫株（敏感株和耐药株）的mRNA转录水平，结果显示EtCHP35基因在敏感株孢子化卵囊的mRNA转录水平最高；与敏感株相比，EtCHP35的mRNA转录水平在马杜拉霉素耐药株和盐霉素耐药株上调，但在地克珠利耐药株mRNA转录水平无差异，且随着盐霉素耐药株浓度的升高，EtCHP35的mRNA 转录水平也升高。间接免疫荧光定位结果表明该蛋白主要分布在子孢子和第二代裂殖子的表面和顶部。因此，推测该蛋白可能参与了虫体在宿主体内的生长发育、对宿主细胞的识别附着、逃避宿主免疫应答以及球虫对离子载体类药耐药性产生的过程。
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