浙贝母干腐病病原真菌分子鉴定

作者：张羽加; 李吉二; 温思思; 徐云飞; 赵伟春^*

来源：农业生物技术学报, 2023, 31(09): 1989-1998.

• 浙贝母
• 干腐病
• 病原真菌分子鉴定

道地药材浙贝母(Fritillaria thunbergii)是浙江省金华市、丽水市等地重要的经济作物之一。近年来真菌性病害频发，其中干腐病发病严重，影响浙贝母产量和质量。本研究采用病组织分离法在马铃薯葡萄糖琼脂培养基(potato dextrose agar, PDA)上分离纯化浙贝母干腐病病原真菌；采用菌落形态、菌丝及孢子形态观察法初步鉴定病原真菌；分别用核糖体内转录间隔区(internal transcribed spacer, ITS)、翻译延伸因子基因(translation elongation factor 1 alpha, TEF-1α)、RNA聚合酶Ⅱ亚基(the second largest subunit of the nuclear RNA polymerase enzyme Ⅱ, RPB2)、热激蛋白60(heat shock protein, HSP60)、3-磷酸甘油脱氢酶(glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase, G3PDH)和茄病镰刀菌特异性序列(ITS-specific fragment of Fusarium solani, SOL)等6个基因的序列对病原真菌基因组DNA进行PCR扩增并测序，在GenBank中进行同源性比对并构建系统发育树，确定菌种种类。采用有创菌饼法和无创菌饼法检测真菌的致病性。结果表明，从浙贝母干腐病病株中分离得到14株真菌分离物，通过PCR扩增和测序分析，最终鉴定出4种病原真菌；通过构建发育树以及致病性实验证明了致病菌分别为茄病镰刀菌(Fusarium solani)、尖孢镰刀菌(F. oxysporum)、变红镰刀菌(F. incarnatum)和木贼镰刀菌(F. equiseti)。本研究明确了浙贝母干腐病致病菌亦可为变红镰刀菌和木贼镰刀菌，并经PCR扩增获得了变红镰刀菌(MN386064)和木贼镰刀菌(MN386065)的G3PDH基因的部分序列，丰富了2种镰刀菌的基因序列，同时也为后续相关研究提供比对基础。

• 单位
  生命科学学院; 浙江中医药大学