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摘要
目的 在耻垢分枝杆菌（Mycobacterium smegmatis,Msm）中克隆并表达结核分枝杆菌（M. tuberculosis,Mtb）RD1区蛋白Rv3873，并评价其在结核病（tuberculosis,TB）血清学诊断中的价值。方法 以Mtb H37Rv标准株全基因组DNA为模板，扩增得到rv3873基因完整序列，克隆至分枝杆菌表达载体pMF406，构建重组质粒pMF406-rv3873，电转化至Msm mc2155，加入乙酰胺诱导表达Rv3873同源重组蛋白（mRv3873），利用亲和层析进行纯化，Western blot分析抗原特异性；ELISA法检测27份TB患者和31份健康者血清IgG抗体，以大肠埃希菌表达的Rv3873(r Rv3873)和免疫优势抗原Ag85A作为对照抗原，评价mRv3873在TB血清学诊断中的作用。结果 在Msm中成功表达了重组Mtb蛋白mRv3873，主要以可溶形式存在，经Ni2+亲和层析柱纯化可获得高纯度（95%）的可溶性重组蛋白，蛋白浓度约为2.0 mg/mL;TB患者组血清中抗mRv3873和Ag85A抗原特异性IgG水平均显著高于健康组（P <0.05），而两组血清r Rv3873特异性IgG水平差异无统计学意义（P> 0.05）;mRv3873抗原与对照抗原Ag85A的诊断效能相当，ROC曲线下面积分别为0.776 0和0.778 4，显著高于异源表达抗原r Rv3873的曲线下面积（0.586 6）。结论在快速生长分枝杆菌Msm中可高水平表达并纯化Mtb RD1区抗原Rv3873，较之异源表达抗原，TB患者产生针对mRv3873的IgG水平显著高于健康人群，分枝杆菌同源表达的mRv3873具有作为TB血清诊断的潜力。
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