禽致病性大肠杆菌体外感染鸡巨噬细胞模型的建立

作者:石海涛; 谭跃荣; 申思阳; 彭璐媛; 伊鹏霏; 付本懂*
来源:中国兽医学报, 2023, 43(05): 924-929.
DOI:10.16303/j.cnki.1005-4545.2023.05.11

摘要

为建立禽致病性大肠杆菌体外感染鸡巨噬细胞模型,通过荧光定量PCR检测了不同感染复数、不同感染时间、不同温度下禽致病性大肠杆菌感染HD11细胞后iNOS、IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10相对表达量的变化;使用Gress法和DCFH-DA法分别检测41℃时不同感染时间和不同感染复数下HD11细胞生成NO和ROS的变化。结果显示:iNOS、IL-1β、IL-6、TNF-α的相对表达量在0.5~4 h呈时间依赖性,并在4 h达到峰值(P<0.01);4 h时,随着感染复数升高,4种促炎基因相对表达量呈降低趋势。当培养温度为41℃时,IL-10表达水平随着感染程度的增加而升高,感染时间为4 h,当MOI=53时,IL-10表达水平达到最大值;NO及ROS在感染早期显著升高(P<0.05),随着感染程度的增加而有所降低;4种促炎基因相对表达量显著高于37℃(P<0.05),当MOI=51时,其相对表达量达到最大值(P<0.01)。因此,选择感染复数为MOI=51,感染时间为4 h,感染温度为41℃作为禽致病性大肠杆菌体外感染鸡巨噬细胞模型的感染条件。为进一步深入研究鸡大肠杆菌的致病机制提供试验依据。

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