摘要
建立一种检测PCV3的LAMP方法,为现场快速诊断提供技术支持。根据PCV3全基因序列,设计了4条特异性引物,通过反应成分和反应条件的优化,建立了检测PCV3的LAMP方法,经过灵敏度试验、特异性试验、重复性试验和临床样品检测对比试验,确定该方法的实用性。结果表明,该方法检测的极限为10 copies/μL的质粒模板,与PRV、PPV、PCV-2、猪大肠杆菌、猪沙门菌DNA无交叉反应,重复性良好。应用该方法检测84份组织病料或血清,PCV3阳性率为15.5%,常规PCR方法阳性率为13.1%,两种检测方法符合率为97.6%(82/84)。LAMP方法比常规PCR方法检出率更高,可用于PCV3的现场快速诊断。
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单位咸阳职业技术学院