新型EGFP标记的杆状病毒转移载体的构建及EGFP的制备

作者:杨军; 王一理; 司履生
来源:西安交通大学学报(医学版), 2006, (5): 433-436,459.
DOI:10.3969/j.issn.1671-8259.2006.05.004

摘要

目的 构建可表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合蛋白的昆虫杆状病毒转移载体,利用Sf-9细胞表达、制备EGFP.方法 用PCR法从pEGFP质粒中扩增EGFP基因,NcoⅠ/SalⅠ双酶切,克隆入杆状病毒转移载体NcoⅠ/SalⅠ酶切位点之间,获得pFB-EGFP质粒;转化E.coli DH10Bac,通过转座子Tn7的介导,获得重组杆状病毒Ac-EGFP;感染Sf-9昆虫细胞;利用激光共聚焦

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