摘要
功能性U6启动子广泛应用于CRISPR系统中,其特性的鉴定有助于相关生物的基因组编辑。为筛选高效的玉米U6启动子,本实验以玉米自交系B73为材料,采用同源克隆的方法克隆到3个ZmU6启动子,利用Transfer PCR方法分别对3个启动子进行截短,并以GUS作为报告基因,构建相应的截短启动子驱动GUS融合表达载体,通过浸花法转化拟南芥。结果表明,经过两轮PCR,获得了3种玉米U6启动子,其长度分别为1114 bp、1119 bp和1165 bp,启动子序列比对发现3种启动子均含有比较保守的USE元件和TATA box。GUS组织化学染色结果表明,克隆的3个截短的ZmU6启动子可以驱动GUS在转基因拟南芥中的表达,研究结果为玉米功能基因组学研究提供参考。
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