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摘要
目的:探讨miR-18a在神经胶质瘤细胞增殖和自噬中的作用。方法:采用瞬时转染的方法将miR-18a inhibitor及其阴性对照(negative control inhibitor, NC inhibitor)分别转染大鼠C6胶质瘤细胞；实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-18a在C6胶质瘤细胞中的表达；CCK-8法检测转染miR-18a inhibitor后C6细胞的增殖活性；mCherry-EGFP-LC3B质粒瞬时转染各组细胞，以动态监测自噬通量；Western blot检测敲低miR-18a后C6细胞中自噬相关蛋白LC3、p62、Beclin1的表达情况；RT-qPCR检测转染miR-18a抑制剂后C6细胞中自噬相关基因Beclin1和LC3B的相对表达水平。结果:RT-qPCR结果显示，与NC inhibitor组相比，miR-18a inhibitor组的miR-18a表达量显著降低(P<0.05)。敲低miR-18a后显著抑制C6胶质瘤细胞的增殖(P<0.05)。倒置荧光显微镜下观察到抑制miR-18a后可阻断自噬流，抑制自噬小体和溶酶体融合。抑制miR-18a可使胶质瘤细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin1蛋白的相对表达量显著降低(P<0.05),p62蛋白的相对表达量明显升高(P<0.05)。敲低miR-18a后能抑制胶质瘤细胞中的Beclin1和LC3B mRNA表达(P<0.05)。结论:miR-18a下调可抑制胶质瘤细胞的增殖和自噬。
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