大黄鱼变形假单胞菌外膜蛋白OMPH和OMPW的原核表达及其多克隆抗体制备

作者：叶毅铭; 何亮银^*; 廖青青; 林永翔; 刘敏; 陈虹坚; 文宇鑫

来源：宁德师范学院学报(自然科学版), 2023, 35(01): 57-64.

DOI：10.15911/j.cnki.35-1311/n.2023.01.008

• 大黄鱼
• 变形假单胞菌
• 外膜蛋白
• 原核表达
• 多克隆抗体

为获取变形假单胞菌外膜蛋白OMPH和OMPW的重组蛋白，研究克隆了ompH和ompW的基因序列，构建重组表达载体并转化宿主菌，成功实现了外膜蛋白的原核表达.结果显示，ompH和ompW基因全长分别为603和690 bp，对应编码200和229个氨基酸；变性聚丙烯酰胺凝胶电泳显示，OMPH和OMPW重组蛋白相对分子质量分别为25.0和28.5 ku，通过Ni+亲和层析纯化后的重组蛋白条带单一.以纯化后的重组蛋白OMPH和OMPW分别免疫小鼠制备其多克隆抗体，酶联免疫吸附试验测得鼠源OMPH和OMPW多克隆抗体的效价分别为40 000和50 000；免疫印迹显示了抗血清与重组蛋白结合活性良好.

• 单位
  宁德师范学院; 生命科学学院