摘要
目的观察60Coγ射线对IEC-6肠上皮细胞糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)信号转导途径的激活效应。方法培养的IEC-6细胞接受6Gy60Coγ射线照射后,分别在照射后5、30、60和120min进行各项实验。应用RT-PCR法检测GSK-3β、Akt、caspase-9和caspase-3mRNA表达变化,Westernblot检测GSK-3β和Akt蛋白磷酸化的变化,分光法检测caspase-9酶活性。结果6Gyγ射线照射后30min GSK-3βmRNA表达开始增高,60、120min GSK-3βmRNA均明显高于对照组;照射后30minGSK-3β蛋白磷酸化水平开始降低,60、120min GSK-3β蛋白磷酸化水平明显低于对照组水平;AktmRNA在γ射线照射后与对照组相比无明显改变;蛋白磷酸化水平在照射后30min开始降低,60和120min均明显低于对照组;caspase-9mRNA在照射后30min开始增高,60和120min均高于对照组,caspase-9酶活性变化趋势与mRNA一致,在照射后30min开始增高,并在辐射后60和120min逐渐升高;caspase-3mRNA在照射后60和120min高于对照组。结论6Gyγ射线照射可以使GSK-3β上游的信号分子Akt磷酸化抑制,活性降低,进一步使GSK-3β在γ射线照射后磷酸化水平降低,被活化,从而激活GSK-3β信号转导途径,激活后的GSK-3β可激活其下游介导的与细胞凋亡相关的蛋白激酶家族的成员caspase-9、-3,从而造成IEC-6细胞的损伤。
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单位第三军医大学