丁酸钠联合Feed促进293F细胞表达PD-1嵌合抗体

作者:黄子逸; 陈晨; 彭雪楠; 申春苹; 朱一蓓; 王雪峰*; 张学光*
来源:江苏大学学报(医学版), 2019, 29(02): 93-97.
DOI:10.13312/j.issn.1671-7783.y190008

摘要

目的:探讨丁酸钠和CHO CD Efficient Feed(以下简称Feed)对293F细胞表达程序性死亡受体-1(PD-1嵌合抗体产量的影响。方法:采用无血清培养基,通过哺乳动物293F细胞瞬时表达抗人PD-1嵌合抗体;在细胞对数生长期添加不同浓度丁酸钠(0,0. 5,1,2,4 mmol/L)处理293F细胞,连续培养7 d,分别在第1,3,5天添加Feed。同时,每24 h对培养细胞进行取样,自动细胞计数仪检测细胞总量和活性,流式细胞术检测细胞周期。结果:丁酸钠联合Feed可有效提高293F细胞表达PD-1嵌合抗体,最高表达量为57.4 mg/L,是对照组产量的近8倍;丁酸钠可抑制细胞过度增殖,并阻滞细胞周期G1期,同时添加Feed可增加抗体产量。结论:丁酸钠控制293F细胞适度增殖,Feed则有利于提高细胞活力,两者作为细胞培养的有效补充剂可显著提高PD-1嵌合抗体的产量。

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