摘要
目的:研究原代培养人早孕绒毛滋养细胞VEGF分泌、基因表达的特点,以及缺氧的调控作用。方法:原代培养早孕绒毛滋养细胞,研究正常和缺氧(氯化钴化学诱导)条件下细胞培养上清液中VEGF含量(ELISA法)以及滋养细胞VEGF mRNA表达(RT-PCR方法)特点。结果:(1)免疫组化技术证实培养细胞角蛋白阳性,波形蛋白阴性,纯度达95%以上;(2)正常培养的滋养细胞在培养12h后分泌产生的VEGF明显增加,至培养结束时的72h达到最高点;缺氧诱导滋养细胞大量分泌产生VEGF的时间提前至缺氧培养后6h,持续至72h无下降,VEGF水平明显高于正常,最高达到2200ng/ml,较正常上升47%;(3)滋养细胞VEGF mRNA表达于培养12h时开始明显上升,至48h时达峰值;缺氧则使VEGF mRNA表达显著上升的时间提前至6h,约12h达峰值。结论:早孕绒毛滋养细胞中存在VEGF基因转录并分泌至细胞外;缺氧诱导VEGF转录增强、分泌增加。
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单位华中科技大学同济医学院附属同济医院; 武汉大学人民医院