PKCε在瑞芬太尼诱导的大鼠脊髓μ阿片受体下调中的作用

作者：陈彦梅; 于萍; 王晓娥; 王文慧; 李林芝; 罗国娅; 崔宇; 陈元^*

来源：热带医学杂志, 2022, 22(05): 606-611+596.

• 瑞芬太尼
• 脊髓
• 蛋白激酶Cε
• μ阿片受体

目的 探讨蛋白激酶Cε(PKCε)在瑞芬太尼诱导的大鼠脊髓μ阿片受体（MOR）下调中的作用。方法 成年雄性SD大鼠分为对照组（Naive组）、瑞芬太尼组（R组）、鞘内注射εV1-2组（εV1-2组）、瑞芬太尼+鞘内注射εV1-2组（R+εV1-2组）。静脉输注瑞芬太尼建立痛觉过敏模型，通过蛋白免疫印迹法检测瑞芬太尼输注后2 h至5 d大鼠脊髓PKCε和MOR总蛋白、膜浆蛋白以及磷酸化蛋白的表达变化。采用免疫荧光组织化学法观察PKCε和MOR在脊髓背角的分布。免疫共沉淀法观察瑞芬太尼输注后大鼠脊髓PKCε和MOR的相互作用情况。瑞芬太尼输注前30 min预先鞘内注射PKCε特异性抑制剂εV1-2，观察其对脊髓PKCε和MOR总蛋白、膜浆蛋白以及其磷酸化水平表达变化的影响。结果 静脉输注瑞芬太尼后1 d，与Naive组相比，脊髓背角PKCε蛋白表达增加[（1.04±0.06）vs.(1.79±0.15),F=13.05,P<0.05],MOR表达下调[（1.07±0.08）vs.(0.57±0.04),F=17.85,P<0.05]，差异均有统计学意义；同时，PKCε[(1.10±0.11)vs.(1.53±0.06),F=12.87,P<0.05]和MOR[(1.00±0.17)vs.(1.62±0.08),F=28.95,P<0.05]磷酸化水平显著升高，PKCε膜表达显著增加[（0.97±0.07）vs.(1.60±0.06),F=23.30,P<0.05],MOR膜表达显著减少[（0.97±0.07）vs.(0.38±0.04),F=28.50,P<0.05]，差异均有统计学意义。免疫荧光双染结果显示，PKCε与MOR在脊髓背角存在共定位，且免疫共沉淀结果表明瑞芬太尼可增强大鼠脊髓背角PKCε和MOR的相互作用。而鞘内注射εV1-2后，与R1d组相比，（R1d+εV1-2）组大鼠脊髓磷酸化PKCε表达水平下降[（1.48±0.09）vs.(1.19±0.07),F=23.80,P<0.05],PKCε膜表达水平下降[（1.65±0.08）vs.(1.15±0.08),F=13.48,P<0.05]，磷酸化MOR表达水平下降[（1.58±0.05）vs.(1.18±0.06),F=21.12,P<0.05],MOR蛋白表达水平升高[（0.53±0.09）vs.(1.11±0.05),F=18.18,P<0.05]，差异均有统计学意义。结论 瑞芬太尼可能通过诱导PKCε的激活，促进脊髓背角MOR磷酸化，进而在介导MOR内化和下调中起关键作用。

• 单位
  中山大学; 中山大学附属第一医院