湿地藓LEAFY基因的克隆及原核表达分析

作者：王琦; 李倩; 阚诗卓; 伍冉; 李映; 鄢波^*

来源：分子植物育种, 2019, 17(17): 5668-5673.

DOI：10.13271/j.mpb.017.005668

• 湿地藓(Hyophila javanica)
• LFY基因
• 原核表达

本研究通过克隆湿地藓(Hyophila javanica) LEAFY基因cDNA和开放阅读框(ORF)全长序列,诱导目的基因表达,旨在明确湿地藓LFY基因的结构特征。采用RT-PCR和RACE的技术克隆得到湿地藓FLORICAULA/LEAFY的同源基因。该基因c DNA全长为1 402 bp和1 219 bp (HjLFY1和HjLFY2)。其开放阅读框(ORF)为1 050 bp,编码349个氨基酸,预测其相对分子质量为40.39 kD。与其它物种的LFY基因氨基酸序列进行同源性比对并构建系统进化树,结果显示,湿地藓LFY基因与小立碗藓LFY基因的亲缘关系最近,同源性达95%。将LFY基因插入pThioHis A载体中,构建pThioHis A/LFY原核表达载体,获得了融合蛋白Trx-LFY,分子量约为53 kD。研究结果为深入探讨其基因结构与功能的关系提供帮助。

• 单位
  西南林业大学