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摘要
转铁蛋白受体(transferrin receptor, TfR)是一种位于细胞膜上的Ⅱ型跨膜二聚体糖蛋白，是犬(Canis lupus familiaris)、猫(Felinae)等肉食动物细小病毒(Carnivorous parvovirus)侵入宿主细胞的受体。为了建立一种检测肉食兽TfR基因表达的TaqMan实时荧光定量PCR方法，并对肉食兽不同组织和传代细胞中的TfR基因表达进行检测分析。本研究参考GenBank中公布的犬、猫的TfR胞外区蛋白基因序列设计合成1对引物和1条特异性TaqMan探针，优化qPCR的反应体系和条件，构建阳性质粒，建立标准曲线，进行敏感性、重复性检验，并使用建立的方法对肉食兽不同组织和传代细胞中的TfR基因表达水平进行了检测分析。结果表明，本研究建立的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法线性关系良好，相关系数为0.998 7；敏感性高，最低检测浓度为67 copies/μL；重复性好，批内和批间评价实验变异系数均小于2.0%。本研究建立了一种检测肉食兽TfR的qPCR方法，敏感性和重复性好，可用于肉食兽不同组织和传代细胞中TfR基因表达的检测。
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