摘要

背景与目的:作为信号转导枢纽的Caveolae与恶性肿瘤发生和耐药密切相关,Caveolin-1为其标志蛋白。本研究探讨Caveolin-1对肿瘤耐药细胞体外生长凋亡的影响及其作用机制。方法:选用乳腺癌Hs578T阿霉素耐药细胞株Hs578T/Dox,通过基因转染技术培育Caveolin-1蛋白过表达细胞株Hs578T/Dox-cav-1作为实验组,空载体转染细胞株Hs578T/Dox-vector作为对照组,Western blot检测细胞Caveolin-1蛋白表达。研究细胞生长凋亡变化:MTT检测细胞生长曲线,流式细胞技术细胞周期分析,检测软琼脂集落形成能力。细胞培养48h,流式细胞技术检测细胞自然凋亡指数;加入凋亡诱导剂-星形孢菌素细胞培养8h,检测星形孢菌素诱导细胞凋亡指数。结果:Hs578T/Dox-cav-1较Hs578T/Dox-vector的Caveolin-1蛋白稳定过表达。Hs578T/Dox-cav-1与Hs578T/Dox-vector细胞生长曲线比较,生长明显增快(P<0.01),软琼脂培养集落形成体积增大、数目增加[(983.6±75.0)vs(700.8±78.9),P<0.01]。细胞周期分析,Hs578T/Dox-cav-1细胞S期和G2/M期细胞比率增大,增殖指数升高[(76.6±4.0)%vs.(58.0±4.1)%]。细胞自然凋亡指数[(5.7±0.5)%vs.(11.3±0.8)%]和星形孢菌素诱导凋亡指数[(13.8±1.2)%vs.(21.4±1.89)%]下降。结论:高表达Caveolin-1蛋白使乳腺癌阿霉素耐药细胞Hs578T/Dox具有更强的生长能力和抗凋亡能力。