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摘要
目的分析他克莫司对γ干扰素(IFN-γ)刺激下HaCaT细胞分泌CXCL9、CXCL10、p-JAK1、p-STAT1的影响, 探讨他克莫司治疗白癜风的作用机制。方法 1、10、20、40、60、80、100、120 mg/L他克莫司预处理HaCaT细胞4 h后, 噻唑蓝法(MTT)检测细胞增殖。HaCaT细胞分为空白对照组, IFN-γ组(500 U/ml), 他克莫司组(20 mg/L)及他克莫司+ IFN-γ组。他克莫司预处理HaCaT细胞4 h, IFN-γ刺激细胞12 h或48 h, 实时荧光定量PCR检测细胞CXCL9、CXCL10 mRNA表达。Western印迹法检测细胞CXCL9、CXCL10、p-JAK1、p-STAT1蛋白表达。ELISA法检测细胞培养上清液CXCL9、CXCL10蛋白含量。结果他克莫司对HaCaT细胞增殖无影响的最大浓度为20 mg/L(P>0.05)。20 mg/L他克莫司预处理HaCaT细胞后, 使IFN-γ刺激下HaCaT细胞表达CXCL9、CXCL10 mRNA分别由10 369.08 ± 7.99、290.02 ± 2.16降低至5 914.33 ± 4.59、114.96 ± 0.73(均P<0.01)。CXCL9、CXCL10、p-JAK1、p-STAT1蛋白表达分别由8.47 ± 0.29、7.87 ± 0.17、4.20 ± 0.18、4.29 ± 0.11降低至7.36 ± 0.13、7.36 ± 0.09、2.60 ± 0.16、3.62 ± 0.19(均P<0.01)。细胞培养上清液中CXCL9、CXCL10蛋白含量分别由1 213.36 ± 0.95、1 722.41 ± 2.57降低至426.45 ± 0.31、554.12 ± 0.56(均P<0.01)。结论他克莫司对IFN-γ刺激下HaCaT细胞分泌CXCL9、CXCL10、p-JAK1、p-STAT1具有抑制作用。
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