用Sleeping Beauty转座子筛选肺癌相关基因及功能研究

作者：朱祥平; 高增鸿; 马若骛; 汪瑾; 刘颖; 郭雅彬^*

来源：岭南现代临床外科, 2023, 23(02): 118-134.

DOI：10.3969/j.issn.1009-976X.2023.02.005

• 非小细胞肺癌
• 睡美人转座子
• 基因筛选
• COL11A1

目的 探讨睡美人（SB）转座子筛选肺癌相关基因的应用。方法 采用Sleeping Beauty转座子插入T2/Onc盒子（T2/Onc cassette）诱变人支气管上皮细胞（HBEC）的模型，挑选阳性克隆，高通量测序筛选共同插入位点（CIS）及候选基因。在非小细胞肺癌（NSCLC）细胞系NCI-H1299中验证筛选出的COL11A1基因功能，采用CCK-8细胞增殖实验等检测NCI-H1299细胞系敲低COL11A1前后的增殖能力及其对顺铂的敏感性变化，采用Transwell细胞迁移、侵袭实验比较其迁移、侵袭能力变化。结果 使用转座子筛选中通用的蒙特卡洛模拟法确定CIS，以P<0.05为界，共找到252个CIS，包括675个候选基因。结果显示，筛选出的COL11A1基因可以促进NCI-H1299细胞系增殖（P<0.01）、迁移（P<0.001）、侵袭（P<0.001）并介导其顺铂耐药（P<0.001）。结论 本研究证明了使用SB转座子插入T2/Onc诱变HBEC的模型能够很好地筛选出肺癌相关基因，并证实了COL11A1可以促进NSCLC细胞增殖、迁移、侵袭并介导顺铂耐药及上皮间质转换。

• 单位
  中山大学孙逸仙纪念医院