miR-146a调控人脐静脉内皮细胞的衰老及机制

作者：安雪青; 吕健东; 苏锋

来源：中国动脉硬化杂志, 2018, 26(11): 1127-1132.

• miR-146a
• 衰老
• 脐静脉内皮细胞
• NADPH氧化酶4

目的探究miR-146a在人脐静脉内皮细胞衰老中的调节作用,并初步探究其机制。方法以人脐静脉内皮ECV-304细胞为研究对象,连续传代建立ECV-304细胞复制性衰老模型,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)法检测不同代次(P2、P6、P9、P12、P15代)细胞中衰老细胞比例,实时定量PCR法检测不同代次(P2、P6、P9、P12、P15代)细胞中miR-146a表达。靶基因预测软件预测miR-146a靶基因。细胞转染建立miR-146a表达上调的P12代细胞(Pre-miR146a组)和miR-146a表达下调的P12代细胞(Anti-miR146a组),并建立相应对照组,SA-β-gal法检测衰老细胞比例,Western blot检测NADPH氧化酶4(NOX4)蛋白表达。结果 P6、P9、P12和P15代细胞的衰老细胞比例明显高于P2代细胞(P<0.05),miR-146a表达则明显低于P2代细胞(P<0.05)。靶基因预测miR-146a的靶基因为NOX4;转染后,Pre-miR146a组衰老细胞比例明显低于对照组(P<0.05),Anti-miR146a组衰老细胞比例明显高于对照组(P<0.05); Pre-miR146a组NOX4蛋白表达明显低于对照组(P<0.05),Anti-miR146a组NOX4蛋白表达明显高于对照组(P<0.05)。结论 miR-146a在衰老的人脐静脉内皮细胞ECV-304中表达下降,上调miR-146a表达能够抑制ECV-304衰老,其机制与调节NOX表达有关。

• 单位
  天津市第五中心医院