摘要

目的制备慢病毒介导成纤维细胞生长因子2(FGF-2)基因转染骨髓基质干细胞(MSCs)与异种脱抗原松质骨(XACB)的组织工程骨,探讨其对兔激素性股骨头缺血坏死的治疗作用及其机制。方法体外分离培养兔MSCs,利用慢病毒介导FGF-2基因转染MSCs并获得稳转细胞株,将其与XACB进行复合培养,获得组织工程骨XACB/MSCs/Lv-GFP-FGF-2。采用内毒素与甲基强的松龙制备兔激素性股骨头缺血坏死模型60只,随机分为AE组各12只,各组进行髓芯减压,A组不进行植骨,B组植入自体松质骨,C组植入XACB/MSCs,D组植入XACB/MSCs/Lv-GFP,E组植入XACB/MSCs/Lv-GFP-FGF-2。术后3、6、12周各组随机处死4只,观察股骨头大体形态,采用免疫组化法检测股骨头组织TNF-α阳性表达率,Real-time PCR法检测股骨头组织TNF-αmRNA表达。结果术后3周,E组可见少量新骨形成,其余各组均未见新骨形成。术后6周,A组缺损区由肉芽组织填充,仍无明显新骨形成;B、C、D组缺损区仍清晰可见,边缘可见新骨形成;E组大部分缺损区已被新骨填充,移植骨已基本被吸收。术后12周,A组仅有少量新骨形成,B、C、D组均未完全修复,E组缺损区修复接近正常松质骨。术后3、6、12周,B、C、D、E组股骨头组织TNF-α阳性表达率及mRNA相对表达量均逐渐降低(P均<0.05)。术后3周,E组股骨头组织TNF-α阳性表达率及mRNA相对表达量均低于A、B、C、D组(P均<0.05);术后6、12周相同时间点,股骨头组织TNF-α阳性表达率及mRNA相对表达量A组>B组>C、D组>E组(P均<0.05)。结论成功制备了组织工程骨XACB/MSCs/Lv-GFP-FGF-2;其治疗兔激素性股骨头缺血坏死的效果较好,作用机制可能为抑制股骨头组织TNF-α表达。