Netrin-1在急性淋巴细胞白血病患者中的表达及意义

作者：李永婧; 安曦洲; 包斌霞; 王涵艺; 唐雪; 姚新原; 刘奇慧; 张璐颖; 梁绍燕; 于洁^*

来源：中国实验血液学杂志, 2020, 28(02): 385-393.

DOI：10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2020.02.005

• Netrin-1
• 急性淋巴细胞白血病
• 侵袭
• 增殖

目的:研究Netrin-1蛋白在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)患者中的表达及其与临床指标的相关性,并探讨其可能的调控机制。方法:采用ELISA法检测48例ALL患儿(初诊、复发)外周血血清中Netrin-1的表达水平,并分析其与27例非恶性血液病患儿对照样本表达水平的差异,进而分析ALL外周血Netrin-1水平与临床指标的相关性。体外培养ALL细胞Jurkat、Molt-4、SUP-B15和Raji,经不同浓度重组人Netrin-1蛋白处理后,用Transwell法检测细胞的侵袭能力; CCK-8法测定Netrin-1对细胞增殖的作用;采用Western blot检测FAK、Erk1/2、PI3K、Akt等信号通路关键蛋白的表达及其磷酸化水平。结果:ALL患儿外周血中Netrin-1的表达量显著高于对照组(P <0.05)。随着Netrin-1表达水平的上调,WBC水平(r=-0. 290,P <0. 05)呈下降趋势,Plt水平(r=0. 483,P <0. 05)呈上升趋势,且与年龄、Hb水平、骨髓幼稚细胞比例无显著相关性; Netrin-1浓度在25-50 ng/ml水平时,Netrin-1水平与WBC(r=0. 886,P <0. 05)呈正相关; WBC> 50×109/L和Plt <20×109/L的患儿Netrin-1表达水平显著降低(P=0. 042,P=0. 001); Netrin-1的表达水平在危险度分级中具有显著性差异(P=0. 017),与低危组与中危组相比,高危组Netrin-1的表达水平显著提高; Netrin-1在性别、肝脾淋巴结肿大、MRD、复发、染色体异常等分组中的表达水平均无显著性差异; Netrin-1对4种细胞的侵袭能力有促进作用(P <0. 05),随着Netrin-1浓度的提高,细胞数有先增加后降低的趋势,且均在Netrin-1浓度为100 ng/ml时,侵袭下室的细胞数最高; Netrin-1浓度为25 ng/ml时,4种细胞存活率显著增加(P <0. 05),其中SUP-B15细胞在浓度为100 ng/ml时,细胞存活率最高; 4种细胞存活率呈现低浓度升高及高浓度降低的趋势; Western blot结果显示,Netrin-1使FAK、Erk1/2、PI3K、Akt等信号通路关键分子磷酸化水平提高(P <0. 05)。结论:ALL患儿血清中存在Netrin-1的异常表达,Netrin-1可能通过增加白血病细胞的增殖、侵袭能力来影响ALL的发生发展,可能成为ALL的危险因素或生物治疗中的潜在靶点。

• 单位
  重庆医科大学附属儿童医院