右美托咪定对氧糖剥夺再复氧下Huvecs的保护机制

作者：姚浩旗; 汪惠文; 王公孝; 杨天德; 陈建^*

来源：重庆医学, 2022, 51(03): 366-369+374.

• 人脐静脉内皮细胞
• 右美托咪定
• 氧糖剥夺再复氧
• AMP依赖的蛋白激酶α

目的探讨右美托咪定(DEX)预处理对氧糖剥夺再复氧条件下人脐静脉内皮细胞(Huvecs)的保护机制。方法人工培养Huvecs,实验分为2部分,氧糖剥夺前细胞分3组:对照组(NC组)、DEX组、DEX+育亨宾(YHB)组。DEX组、DEX+YHB组加入50μmol/L的DEX和100μmol/L的YHB处理细胞2 h, DEX组加入50μmol/L的DEX处理细胞2 h。氧糖剥夺再复氧后细胞分为4组:对照组(NC组)、ogd/r组、DEX+ogd/r组、DEX+YHB+ogd/r组。DEX+ogd/r组加入50μmol/L DEX预处理2 h, DEX+YHB+ogd/r组加入50μmol/L DEX和100μmol/L YHB处理2 h, ogd/r组加入等体积的PBS,随后将3组细胞置于Hank′s液中于缺氧恒温细胞培养箱内培养12 h,之后换正常培养基置于常氧恒温培养箱内培养4 h, NC组置于正常条件下培养18 h。采用Western blot检测各组Huvecs内部AMP依赖的蛋白激酶α(AMPKα)磷酸化水平,通过Seahorse能量分析检测缺氧复氧前各组Huvecs线粒体呼吸功能。结果与NC组相比,DEX组线粒体基础氧耗速率升高(P<0.05),最大氧气消耗速率升高(P<0.05),线粒体三磷酸腺苷(ATP)产生能力升高(P<0.05);与DEX组相比,DEX+YHB组线粒体基础氧耗速率降低(P<0.05),最大氧气消耗速率降低(P<0.05),线粒体ATP产生能力降低(P<0.05);与ogd/r组相比,DEX+ogd/r组AMPKα磷酸化水平升高(P<0.05);与DEX+ogd/r组相比,DEX+YHB+ogd/r组AMPKα磷酸化水平降低(P<0.05)。结论 DEX预处理激活AMPKα分子可提高Huvecs的线粒体呼吸功能,减轻氧糖剥夺再复氧条件下的损伤。

• 单位
  重庆医科大学; 中国人民解放军陆军军医大学