猪圆环病毒3型去核定位信号的Cap蛋白原核表达

作者：陈如敬; 吴学敏; 陈秋勇; 严山; 车勇良; 王晨燕; 周伦江^*

来源：动物医学进展, 2020, 41(11): 24-28.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2020.11.005

• 猪圆环病毒3型
• 去核定位信号
• 结构蛋白
• 原核表达

为探讨猪圆环病毒3型(PCV3)去核定位信号结构蛋白(Cap)的生物学功能及其在血清学检测中的作用,应用Oligo 7.0软件设计特异性引物序列,采用PCR方法从PCV3福建株阳性核酸中扩增获得其去核定位信号的Cap基因片段。将目的片段克隆到原核表达载体pET28a(+)上获得阳性重组表达质粒pET28a-Cap,进行原核表达条件优化。经SDS-PAGE分析其最优表达条件为IPTG浓度为0.4 mmol/L、37℃诱导表达4 h,目的蛋白大小约为25 ku。表达的去核定位信号Cap蛋白经Western blot和ELISA分析,具有良好的生物学活性。研究结果为开展PCV3去核定位信号基因功能研究和储备血清学诊断试剂盒奠定了基础。

• 单位
  福建省农业科学院