微小RNA-17通过抑制波形蛋白表达影响上皮-间充质转化对前列腺癌细胞侵袭能力的影响及其机制

作者：李永章; 陈文彬; 杨冰琦^*; 艾宁

来源：中华实验外科杂志, 2021, 38(06).

• 前列腺癌
• 微小RNA
• 侵袭

目的观察前列腺癌(PC)细胞中微小RNA(miR)-17对波形蛋白(Vimentin)表达的影响, 及与上皮-间充质转化(EMT)及细胞侵袭间的关系。方法收集河北省中医院泌尿外科2019年1月至2020年12月间20例前列腺癌组织及其癌旁组织标本;采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)的方法检测miR-17的表达水平;将miR-17模拟物转染到前列腺癌(LNCaP)细胞中, 应用蛋白质印迹法(Western blot)实验检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)及E盒结合锌指蛋白2(ZEB2)蛋白的表达水平, 采用双荧光素酶报告基因实验及荧光定量PCR观察miR-17与Vimentin基因间的关系;随后, 将miR-17模拟物与Vimentin过表达质粒共转染至前列腺癌细胞中, 应用Transwell细胞侵袭实验观察miR-17与Vimentin表达变化对前列腺癌细胞侵袭能力的影响。组间比较采用t检验。结果荧光定量PCR结果表明, miR-17在前列腺癌组织中的表达水平(0.45±0.07)低于癌旁组织(1.02±0.08)中的表达水平(t=9.182, P<0.05), 差异有统计学意义;细胞侵袭实验结果表明, miR-17模拟物转染组侵袭细胞数(106.00±11.78)低于对照组(266.33±13.05, t=15.790, P<0.05), 差异有统计学意义;Western blot实验结果表明, miR-17模拟物转染组E-cadherin蛋白表达(0.86±0.08)高于对照组(0.43±0.12, t=5.203, P<0.05), 差异有统计学意义, N-cadherin蛋白表达量(0.33±0.08)低于对照组(0.88±0.08, t=7.804, P<0.05), 差异有统计学意义, ZEB2蛋白表达量(0.37±0.04)低于对照组(0.84±0.07, t=9.436, P<0.05), 差异有统计学意义;双荧光素酶报告基因实验结果表明, miR-17模拟物转染组荧光素酶活性(0.39±0.04)低于对照组(1.06±0.06, t=15.023, P<0.05), 差异有统计学意义;荧光定量PCR实验结果表明miR-17模拟物组Vimentin基因的表达水平(0.49±0.10)低于对照组(1.02±0.04, t=7.940, P<0.05), 差异有统计学意义;miR-17模拟物与Vimentin过表达质粒共转染组侵袭细胞数(243.00±14.17)与对照组(247.66±13.65)比较, 差异无统计学意义(t=0.410, P>0.05)。结论 miR-17可通过靶向Vimentin抑制前列腺癌细胞上皮-间充质转化进而抑制其侵袭能力。

• 单位
  河北医科大学第四医院; 河北省中医院