基于GLP-1R/cAMP/PKA/CREB的泽泻汤促进白色脂肪棕色化/激活棕色脂肪作用机制研究

作者：丁婧; 赵洁; 王萌萌; 苏烜; 高改; 徐江雁^*; 谢治深^*

来源：中国中药杂志, 2023, 48(21): 5851-5862.

DOI：10.19540/j.cnki.cjcmm.20230710.704

• 泽泻汤
• 棕色脂肪
• 3T3-L1
• GLP-1R/cAMP/PKA/CREB

基于GLP-1R/cAMP/PKA/CREB探讨泽泻汤(Zexie Decoction, ZXD)体内外促进白色脂肪棕色化/激活棕色脂肪的作用机制。西式饮食(western diet, WD)诱导高脂血症小鼠模型，设置对照组，WD组(模型组),ZXD低、中、高剂量组；体外诱导3T3-L1细胞成脂分化模型，以毛喉素(forskolin, FSK)作为阳性对照，设置ZXD低、中、高剂量组。免疫组化与免疫荧光结果提示，与WD组相比，泽泻汤促进白色和棕色脂肪组织中UCP1表达；同时泽泻汤上调了细胞中UCP1、CPT1β、PPARα等基因；Western blot检测PGC-1α、UCP1、PPARα的蛋白表达也表现出随泽泻汤剂量依赖性升高，表明泽泻汤促进白色脂肪棕色化/激活棕色脂肪。苏木素-伊红(HE)染色结果显示，相较于WD组，泽泻汤处理后，白色和棕色脂肪细胞明显缩小，ATGL、HSL、MGL、PLIN1的mRNA表达显著上调；油红O染色和生化试剂盒检测细胞TC、TG水平均提示泽泻汤改善脂质蓄积，促进脂肪分解。p-CREB免疫组化和免疫荧光发现，泽泻汤处理逆转了WD导致的p-CREB表达降低；在泽泻汤的体外干预下，CREB、p-CREB、p-PKA substrate的蛋白表达均明显增加，CREB的mRNA水平增加；ELISA检测发现泽泻汤增加细胞内cAMP浓度；分子对接分析结果显示泽泻、白术中多个活性成分可与GLP-1R形成氢键稳定结合。综上所述，泽泻汤在体内外均能促进白色脂肪棕色化/激活棕色脂肪，其作用机制可能与GLP-1R/cAMP/PKA/CREB通路有关。

• 单位
  河南中医药大学